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武漢原生原代生物醫(yī)藥科技有限公司

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G422小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞

參  考  價: 1350

訂  貨  量: ≥1 瓶

具體成交價以合同協(xié)議為準

產(chǎn)品型號:

品       牌:PriCells/原生原代

廠商性質(zhì):生產(chǎn)商

所  在  地:武漢市

更新時間:2021-10-25 14:45:13瀏覽次數(shù):202次

聯(lián)系我時,請告知來自 化工儀器網(wǎng)
供貨周期 一周 規(guī)格 1 × 10^6 細胞數(shù)/1ml
應用領域 醫(yī)療衛(wèi)生,化工,生物產(chǎn)業(yè) 主要用途 科研
G422小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞介紹
1964年建株;甲基膽蒽植入Km小鼠腦內(nèi)誘發(fā)星形細胞瘤,傳至第120代后轉(zhuǎn)為膠質(zhì)細胞瘤;瘤細胞懸液同系小鼠皮下、肌肉、腦內(nèi)移植,成功率皆100%。肌肉及腦內(nèi)移植可形成較規(guī)律的移植性瘤株,存活時間腦內(nèi)型15.9±4.8天;肌肉型20.3±6.6天。

G422小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞

細胞介紹

1964年建株;甲基膽蒽植入Km小鼠腦內(nèi)誘發(fā)星形細胞瘤,傳至第120代后轉(zhuǎn)為膠質(zhì)細胞瘤;瘤細胞懸液同系小鼠皮下、肌肉、腦內(nèi)移植,成功率皆100%。肌肉及腦內(nèi)移植可形成較規(guī)律的移植性瘤株,存活時間腦內(nèi)型15.9±4.8天;肌肉型20.3±6.6天。


細胞特性

1) 來源:小鼠 腦

2) 形態(tài):上皮細胞樣 貼壁生長

3) 含量:>1x10^6  細胞數(shù)

4) 規(guī)格:T25瓶或者1mL凍存管包裝

5)  用途:僅供科研使用。


G422小鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞

運輸和保存

干冰運輸及復蘇好存活細胞

(1)1mL凍存管包裝干冰運輸,收到后-80度冰箱保存過夜后轉(zhuǎn)入液氮或直接復蘇,若發(fā)現(xiàn)干冰已揮發(fā)干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染,請立即與我們聯(lián)系。

(2)T25瓶復蘇的存活細胞常溫發(fā)貨,收到后按照細胞接收后的處理方法操作。


細胞接收后的處理

1)收到細胞后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置約2-3h,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損、有液溢出及細胞有污染,請拍照后及時聯(lián)系我們。

2)請在4或5X顯微鏡下確認細胞狀態(tài),同時給剛收到的細胞拍照(10×,20×)各2-3張以及培養(yǎng)瓶外觀照片一張留存,作為售后時收到時細胞狀態(tài)的依據(jù)。

3)貼壁細胞:細胞在37℃培養(yǎng)箱中放置2-3h,顯微鏡下觀察細胞的生長和貼壁情況,有些貼壁細胞在快遞運送過程中會因振動脫落和脫落后成團的情況。若鏡下觀察細胞的生長密度若在60%以下,可去除培養(yǎng)瓶中灌液培養(yǎng)基(若有未貼壁的細胞需要離心回收,重懸打入到原培養(yǎng)瓶中),加入新配制的*培養(yǎng)基6-8mL,放到細胞培養(yǎng)箱中繼續(xù)培養(yǎng)。若細胞生長密度達70%-80%以上,可以對細胞進行傳代處理。傳代過程中,若因運輸振動脫落的細胞需要離心回收。

4)備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。  收到細胞后第一次傳代建議T25培養(yǎng)瓶1:2傳代 。       


一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備

1) 準備DMEM (推薦0001)培養(yǎng)基;優(yōu)質(zhì)胎牛血清,10%;雙抗,1%。

2) 培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37攝氏度,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。

3) 凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配。


二.細胞處理:

1) 凍存細胞的復蘇:

將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入到含4-6mL*培養(yǎng)基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,*培養(yǎng)基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml*培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶(或皿)中37℃培養(yǎng)過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2) 細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。


對于貼壁細胞傳代可以參考以下方法:

1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。

2. 加入0.25%(w / v)胰蛋白酶-0.53 mM EDTA于培養(yǎng)瓶中(T25瓶1-2mL,T75瓶2-3mL),置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘(難消化的細胞可以適當延長消化時間),然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養(yǎng)基來終止消化。 

3.輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心3-5min,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1:2的比例分到新T25瓶中,添加6-8ml按照說明書要求配置的新的*培養(yǎng)基以保持細胞的生長活力,后續(xù)傳代根據(jù)實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3)細胞凍存: 收到細胞后建議在培養(yǎng)前3代時凍存一批細胞種子以備后續(xù)實驗使用。


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